商品詳情：
硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒測(cè)定意義

硝酸還原酶(NiR)是一類(lèi)能催化亞硝酸鹽還原的酶，廣泛存在于微生物及植物體內(nèi)，是自然界氮循環(huán)過(guò)程中的關(guān)鍵酶，可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3，從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累，降低因亞硝酸鹽累積而造成的對(duì)生物體的毒害作用。

測(cè)定原理

亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。

需自備的儀器和用品

天平、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、低溫離心機(jī)。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

腎膠原凝集素1ELISA試劑盒 CLK1免費(fèi)代測(cè)試劑

腎胱素7ELISA試劑盒 NPHP7免費(fèi)代測(cè)試劑

腎胱素5ELISA試劑盒 NPHP5免費(fèi)代測(cè)試劑

腎病型胱胺癥蛋白ELISA試劑盒 CTNS免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)秩蛋白ELISA試劑盒 NRTN免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)正五聚蛋白受體ELISA試劑盒 NPTXR免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)源性絲氨抑制劑ELISA試劑盒 NSP免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)源性分化蛋白6ELISA試劑盒 NEUROD6免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)源性分化蛋白4ELISA試劑盒 NEUROD4免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)源性分化蛋白2ELISA試劑盒 NEUROD2免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)源性分化蛋白1ELISA試劑盒 NEUROD1免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)源素2ELISA試劑盒 NEUROG2免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)源素1ELISA試劑盒 NEUROG1免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)元導(dǎo)向因子3ELISA試劑盒 NAV3免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)元導(dǎo)向因子2ELISA試劑盒 NAV2免費(fèi)代測(cè)試劑
硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒二磷核酮糖羧化酶（Rubisco）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

二磷核酮糖羧化酶（Rubisco）比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

二磷核酮糖羧化酶（Rubisco）比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣

3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣

果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

磷丙糖異構(gòu)酶（TPI）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣